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微透析采样技术实施之前我们最先需要确定的是透析所使用的探针类型。
脑部探针是微透析实验关键成员,结构如图所示:
1、探针大部分为Y型结构
2、探针上端的inlet和outlet分别代表灌流液的进口端和出口端(针对脑部探针也可表述为短进长出)。
3、探针的柄长度根据使用对象的不同会有所不同。
4、探针的透析膜:探针的透析膜位于探针的尖端,长度有1mm,2mm,3mm,4mm,10mm。根据想要透析的位置选择不同的膜长。
5、透析膜的分子截留量:最常用的分子截留量为2万道尔顿,即:这个半透膜允许分子量在2万以下的小分子透过进入灌流液,像蛋白,肽类这些大分子的物质是无法透过半透膜进入探针的,所以采用微透析技术取得的样品可以直接进高效液相色谱进行检测,不会造成系统的堵塞。
探针结构示意图
大部分的探针都具有以上特征,根据使用的物种和部位不一样又详细进行了分类:
CMA/7:小鼠脑部的微透析探针
根据所测脑区核团的大小可有1mm和2mm两种膜长可供选择,膜的直径为0.24mm。分子截留量为:6000 Daltons
CMA/11、CMA/12:大鼠脑部探针
根据所测脑区核团的大小有1mm,2mm,3mm,4mm四种膜长可供选择;膜的直径为0.5mm。CMA11分子截留量为:6000 Daltons,CMA12分子截留量为:20000 Daltons和100000 Daltons
CMA/20:大鼠血液探针
除了做血液的微透析,也可以做肝脏、肾脏、皮肤、肌肉、肺部、关节、心脏等部位,应用范围广。膜长有10mm和4mm两种可供选择,膜的直径为0.5mm。分子截留量为:20000 Daltons和100000 Daltons