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微透析采样技术
小动物活体取样技术,简单来说就是在小动物清醒自由活动或者麻醉的情况下,把动物体内的体液,比如血液,胆汁,脑脊液取出来的过程。血液、胆汁一般采取体内埋管的形式来实现,脑脊液的提取一般直接从动物枕骨大孔处抽取。
由此方法得到样品的优势在于:
1、手术难度相对较小,通过手术在血管,胆管植入管路就可以实现对应样品的采集。
2、不需要使用特殊设备来支持实验的完成。
3、成本比较低。
缺点在于:
1、得到的样品在检测前需要步骤繁琐的前处理,保证不会污染检测设备。
2、血液的长时间的多次抽取,会造成动物血容量的下降,无法保证动物后期是在一个正常的生理状态下进行实验。
为了解决上述缺点,目前实验室多采用的是微透析采样技术,通过埋植一个带有半透膜的探针到动物的组织内,从而让组织中的小分子物质(药物,多巴胺,5-HT等)渗透到半透膜中,通过灌流,把渗透到半透膜中的物质冲洗出来进行收集,之后进行检测,得到相应物质的浓度值。
通过本方法得到的样品有以下优点:
1、样品无需进行前处理:可直接用液相,质谱进行检测。
2、可以在动物体内大部分组织(脑、血、肝、肾、皮肤、肌肉、关节等)埋置探针进行取样。
微透析探针结构图
3、动物在清醒自由活动的状态下进行样品采集,更接近于动物正常生理状态。
4、在透析的过程中可以结合电生理,光遗传等其他实验,观察同一只动物在不同干预手段下,电信号和化学信号的不同表现。
微透析系统组成